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核酸提取或纯化试剂

核酸提取或纯化试剂

用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。

产品信息:

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的磁珠和独特的缓冲系统,采用的硅基质磁珠和试剂配合,具有高效、专一提取DNA,可最大限度去除杂志蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。

使用方法:

1.使用核酸提取试剂前

①、将蛋白酶k溶剂移入含有蛋白酶k冻干粉中,混匀。

②、型号CY-F006-10(50preps-细胞)和CY-F006-21(50preps-唾液)的CY3、CY4分别加入18ml、42ml无水乙醇,混匀。

③、型号CY-F006-11(100preps-细胞)和CY-F006-21(100preps-唾液)的CY3、CY4分别加入36ml、84ml无水乙醇,混匀。

2.拭子提取步骤:

①、拭子干采加0.6mlCY1液体,10ul蛋白酶k,混匀,放置于65摄氏度空气培养箱培养30min(或湿采:装有拭子加保存液的样本离心管在12000rpm条件下离心1分钟,保留沉淀,去除上清液。加0.6mlCY1液体,10ul蛋白酶k,混匀,放置于65摄氏度空气培养箱培养30min)。

②、去掉拭子,12000rpm离心1min。

③、取出全部上清到新的离心管,做实验。

④、加入0.25mlCY2液体,10ul磁珠*(使用前摇匀),混匀12min,放置在磁力架上静置30s,洗掉液体。

⑤、加入0.6mlCY3液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。

⑥、加入0.6mlCY4液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体

⑦、重复步骤2.6

⑧、室温干燥10-20min,加50ulCY5液体洗脱,混匀,放置在磁力架上静置30s,专一液体到新的离心管

⑨、测OD

3.唾液提取步骤

①、唾液加保存混合液12000rpm离心1min

②、保留沉淀,去除上清液

③、往里面加入0.6mlCY1液体和10ul蛋白酶k,混匀,放置于65摄氏度空气培养箱培养30min。

④、12000rpm离心1min,取出全部上清到新的离心管,加10ul磁珠和0.25mlCY2,混匀12min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。

⑤、加入0.6mlCY3液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。

⑥、加入0.6mlCY4液体,混匀3min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。

⑦、重复⑥步骤

⑧、室温干燥10~20min,加50ulCY5液体洗脱,混匀,放置在磁力架上静置30s,转移液体到新的离心管。

⑨、测OD

注:如需除RNA,可自行配制RNaseA10mg/ml:溶剂(10mM乙酸钠:pH5.0),煮沸15min用Tris-Hcl调pH7.5,-20摄氏度保存。

产品性能指标:

①、核酸提取试剂为无色透明液体(磁珠为黑色液体),不得有污染、漏液现象。

②、每支提取试剂的容量为0.8ml/1.1ml/6ml/12ml/18ml/24ml/36/48ml/72ml。

③、CY1和CY5的pH应为8.0

④、OD260/OD280比值应为1.6-1.9,核酸得量应符合(表1)的要求

材料提取量DNA得量
口腔拭子1个3.2-11.2ug
唾液200ul3-6ug
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